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【FACSCelesta实验应用系列】之10色T细胞亚群的免疫分型

发布时间:2021-11-05      点击次数:232

实验概述】

本实验成功采用FACSCelesta的10色方案进行人外周血白细胞中T细胞亚群的的免疫分型,实现了一管即清楚区分Th/Ts/Treg/TEM/TCM/NaïveT/Mature T等十几个T细胞亚群,对于T细胞亚群的成熟、分化及活化等的研究起到重要作用!

 

【实验方法】

    ①/ 仪器配置

 

  Flow cytometer  Laser
  FACSCelesta  488nm Blue Laser
  640nm Red Laser
  405nm Red Laser

 

    ②/ 多色配色方案及流式试剂

 

    ● 配色方案

PEAPC-Cy7Alexa Fluor-700BV421BV510BV605PE-CF594PerCP-Cy5.5BB515BV786
CD127CD3CD45RACD25CD8CD4CCR7CD45CD28CD27

 

    ● 流式试剂

 

  Products NameCatalog No.CloneSize
  BD Pharmingen™ PE Mouse Anti-Human CD127557938HIL-7R-M210.1 mg
  BD Pharmingen™ APC-Cy™7 Mouse Anti-Human CD3557832SK7100T
  BD Pharmingen™ Alexa Fluor® 700 Mouse Anti-Human CD45RA560673HI10050T
  BD Horizon™ BV421 Mouse Anti-Human CD25562442M-A251100T
  BD Horizon™ BV510 Mouse Anti-Human CD8563919SK1100T
  BD Horizon™ BV605 Mouse Anti-Human CD4562658RPA-T4100T
  BD Horizon™ PE-CF594 Mouse Anti-Human CD197 (CCR7)56238115050350T
  BD Pharmingen™ PerCP-Cy™5.5 Mouse Anti-Human CD45564105HI30100T
 BD Horizon™ BB515 Mouse Anti-Human CD28564492CD28.2100T
 BD Horizon™ BV786 Mouse Anti-Human CD27563327L128100T
 BD Pharm Lyse™ Lysing Buffer (10x )555899
100ml

 

【实验结果】

 

如图所见,所有群体阴阳性区分明显,群体集中,即使是弱表达群体Treg也区分非常清楚,实验中使用了Diva软件的自动补偿功能,补偿准确、操作极其简单,为多色实验提供方便、快捷且精确的补偿操作。

* 本资料仅限科研用途使用


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